Российские исследователи разработали инновационный подход к повышению точности полимеразной цепной реакции (ПЦР), что приобретает особую значимость в контексте диагностики заболеваний крупного рогатого скота, овец и коз. Предложенный метод позволяет минимизировать риск ложноотрицательных результатов и обеспечивает своевременное выявление инфекционных агентов.
Ключевая проблема заключается в том, что отрицательный результат ПЦР не является безусловным свидетельством отсутствия возбудителя. Ложноотрицательный ответ может быть обусловлен деструкцией клеток, затруднениями при экстракции ДНК или РНК, а также присутствием ингибирующих веществ, препятствующих протеканию реакции. В подобных случаях результат оказывается недостоверным, несмотря на фактическое наличие инфекции.
Стандартная практика контроля качества анализа предусматривает введение в пробу специального материала перед проведением исследования. Однако такой подход не всегда обеспечивает верификацию начального этапа — лизиса клеток и получения нуклеиновых кислот.
Авторы работы предложили использовать в качестве внутреннего контроля гены самого животного, присутствующие в образце изначально. Указанные гены проходят все стадии пробоподготовки совместно с исследуемым материалом, что даёт возможность оценить корректность подготовки образца и эффективность протекания ПЦР.